LH Elisaのキットの黄体形成ホルモン

1. 意図されていた使用

人間の血清の黄体形成ホルモンの生体外の量的な決定のための免疫学的検定。

2. 概要

• LH （黄体形成ホルモン）は、FSH （小胞刺激ホルモン）とともに性腺刺激ホルモン家族に、属する。LHおよびFSHはおよび生殖腺の成長そして機能を（卵巣および睾丸）共働作用して刺激するために調整する。FSHのように、TSHおよびhCG、LHは2つの亜単位から成っている糖蛋白質である（α-およびβ鎖）。（1つ、2に、3） 121アミノ酸および3つの砂糖の鎖から成っているこのproteohormone 29500のdaltonsの分子量がある。女性では月経を制御するために、性腺刺激ホルモンは視床下部下垂体卵巣調整回路の内で機能する。
• LHおよびFSHは脳下垂体前葉およびパスの生殖腺刺激性の細胞から卵巣への血流によって脈拍で解放される。ここに性腺刺激ホルモンはエストロゲンおよびプロゲステロンの小胞そしてそれ故に生合成の成長そして成熟を刺激する。最も高いLH集中は中間周期のピークの間に起こり、主な分泌プロダクトがプロゲステロンである体のluteumの排卵そして形成を引き起こす。睾丸のLeydigの細胞では、LHはテストステロンの生産を刺激する。LHの集中の決定は視床下部下垂体生殖腺システム内の機能障害の説明で使用される。FSHと共のLHの決定は次の徴候のために利用される:染色体異常（例えばターナーのシンドローム）、amenorrheaの原因、menopausalシンドロームおよび疑われたLeydigの細胞の不十分を明白にするpolycystic卵巣（PCO）が付いている先天性疾患。（1、4、5）

3. テスト主義

サンドイッチ主義。試金の総持続期間:80分。

•サンプル、反LHはmicrowellsに塗り、酵素によって分類される反LHは結合される。

•孵化の間に、LHはサンプルで反応するために割り当てられる示す

同時にあるLHの分子に終る2つの抗体と、

固相と酵素つながれた抗体の間で挟まれる。

•洗浄の後で、複合体は固相、サンプル内のLHおよび免疫学の反作用による酵素つながれた抗体の間で発生する。

•基質の解決はchromogenic反作用に終ってこの複合体によってそして、加えられ、触媒作用を及ぼされる。生じるchromogenic反作用は吸光度として測定される。

•吸光度はサンプルのLHの量に比例している。

試薬

提供される材料

•塗られたMicroplateの8つのx12ストリップ、monoclonalマウスとプリコートされる96の井戸

反LH.

•口径測定器、使用可能な6つのガラスびん、1つのmlそれぞれ;集中:0 （A）、5 （B）、20 （C）、50 （D）、100 （E）および200 （F） mIU/mL。

•酵素の共役、1つのガラスびんは、HRP （西洋わさびの過酸化酵素）の11のmLマウスをBSA （牛のようなアルブミン）を含んでいるTris NaCl緩衝のmonoclonal反LHと分類した。0.1% ProClin300防腐剤を含んでいる。

•基質、1つのガラスびん、使用可能な11ml （tetramethylbenzidine） TMB。

•解決、1つのガラスびん、硫酸1つのmol/Lのの6.0 mlを停止しなさい。

•洗浄解決の濃縮物、1つのガラスびん、25のmL （40X集中した）、PBSプレティーンは

洗浄解決。

•IFUの1枚のコピー。

•版のふた:1部分。

必要なが、材料（提供されなくて）

•450nmおよび620nm波長の吸収性の機能のMicroplateの読者。

•Microplateの洗濯機。

•定温器

4. 試験手順

•井戸の必要な数だけ使用し、microplatesの井戸をのための書式作成しなさい

試金されるべき各口径測定器およびサンプル。

•各井戸に口径測定器またはサンプルの25 μLを加えなさい。

•各井戸に酵素の共役の100 μLを加えなさい。

•混合するために30秒の間microplateを穏やかに揺すりなさい。

•版を版のふたで覆い、60分の37 °Cで孵化させなさい。

•デカンテーションか抱負によってマイクロ版の内容を放棄しなさい。

デカントして、吸収性のペーパーとの版乾燥したの叩き、しみを付けなさい。

•洗浄解決の350 μLを加えなさい、（蛇口およびしみ）デカントしなさいまたは吸い出しなさい。合計5洗浄のための4つの付加的な回を繰り返しなさい。自動化されたmicroplateのストリップの洗濯機は使用することができる。洗浄の終わりに、版を逆にし、吸収性のペーパーに残りの洗浄解決を叩きなさい。

•各井戸に基質の100 μLを加えなさい。

•20分の反作用のための暗闇の周囲温度（18-25℃）で孵化させなさい。小国家の付加の後で版を揺すってはいけない。

•各井戸に停止解決の50 μlを加えなさい。

•井戸内の液体を混合するために15-20秒の間揺すりなさい。それは重要にとってである

完全に黄色になるためにことを青い色の変更確認しなさい。

•450 nmで各井戸の吸光度を読みなさい（620へのとして630 nmを使用して

マイクロ版の読者の健康な欠陥を）最小にする参照の波長。